一、高压杀菌锅使用前要水加到水位线； 

二、将需杀菌的培养基、蒸馏水或其它器皿放入杀菌锅内，关闭杀菌锅盖，检查排气阀、安全阀状态。

三、打开电源，检查参数设置是否正确，然后按下“work”键，杀菌锅开始工作；自动派冷气，到105℃时，底部排气阀门自动关闭，然后压力开始上升； 

四、压力升至 0.15MPa（121℃）时，杀菌锅再次自动放气，然后开始记时，一般培养基杀菌20min，蒸馏水杀菌30min； 

五、达到规定的杀菌时间后，关闭电源，打开放气阀缓慢放气；当压力指针降至 0.00MPa时，放气阀无蒸汽排除时，方可开启锅盖。 

六、注意事项  1、汽未放尽前，不得开启高压杀菌锅；  2、如果杀菌后的培养基在锅内不及时拿出，需在蒸汽放尽后将锅盖打开，切忌将培养基封闭在杀菌锅内过夜。  3、压力表指针在0.05MPa以上时，不能过快放汽，以防止压力急速下降，液体滚沸，从培养容器中溢出。 4、操作过程，请注意安全，小心烫伤。

高温杀菌锅的使用方法

1．首先将内层杀菌桶取出，再向外层锅内加入适量的水，使水面与三角搁架相平为宜。 

2．放回杀菌桶，并装入待杀菌物品。注意不要装得太挤，以免防碍蒸汽流通而影响杀菌效果。三角烧瓶与试管口端均不要与桶壁接触，以免冷凝水淋湿包口的纸而透入棉塞。 

3．加盖，并将盖上的排气软管插入内层杀菌桶的排气槽内。再以两两对称的方式同时旋紧相对的两个螺栓，使螺栓松紧一致，勿使漏气。 

4．用电炉或煤气加热，并同时打开排气阀，使水沸腾以排除锅内的冷空气。待冷空气完全排尽后，关上排气阀，让锅内的温度随蒸汽压力增加而逐渐上升。当锅内压力升到所需压力时，控制热源，维持压力至所需时间。本实验用 1．05kg/cm2，121．3℃，20分钟杀菌。 

5．杀菌所需时间到后，切断电源或关闭煤气，让杀菌锅内温度自然下降，当压力表的压力降至0时，打开排气阀，旋松螺栓，打开盖子，取出杀菌物品。如果压力未降到0时，打开排气阀，就会因锅内压力突然下降，使容器内的培养基由于内外压力不平衡而冲出烧瓶口或试管口，造成棉塞沾染培养基而发生污染。

6．将取出的杀菌培养基放入 37℃温箱培养24小时，经检查若无杂菌生长，即可待用。 不过有几点要注意的： 1.杀菌锅内必须要有充足的水。 2.锅的气密性一定要很好。 3.使用完后一定要放到适合温度才可以打开。